注冊(cè)干貨|什么情況下需要補(bǔ)充申請(qǐng)？

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發(fā)表時(shí)間：2021-01-21 17:18作者：精誠CRO注冊(cè)部


圖片



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依據(jù)：藥品注冊(cè)管理辦法（27號(hào)令）


圖片第十一條   變更原藥品注冊(cè)批準(zhǔn)證明文件及其附件所載明的事項(xiàng)或者內(nèi)容的，申請(qǐng)人應(yīng)當(dāng)按照規(guī)定，參照相關(guān)技術(shù)指導(dǎo)原則，對(duì)藥品變更進(jìn)行充分研究和驗(yàn)證，充分評(píng)估變更可能對(duì)藥品安全性、有效性和質(zhì)量可控性的影響，按照變更程序提出補(bǔ)充申請(qǐng)、備案或者報(bào)告。


第二十九條   藥物臨床試驗(yàn)期間，發(fā)生藥物臨床試驗(yàn)方案變更、非臨床或者藥學(xué)的變化或者有新發(fā)現(xiàn)的，申辦者應(yīng)當(dāng)按照規(guī)定，參照相關(guān)技術(shù)指導(dǎo)原則，充分評(píng)估對(duì)受試者安全的影響。


第三十一條   藥物臨床試驗(yàn)被責(zé)令暫停后，申辦者擬繼續(xù)開展藥物臨床試驗(yàn)的，應(yīng)當(dāng)在完成整改后提出恢復(fù)藥物臨床試驗(yàn)的補(bǔ)充申請(qǐng)，經(jīng)審查同意后方可繼續(xù)開展藥物臨床試驗(yàn)。藥物臨床試驗(yàn)暫停時(shí)間滿三年且未申請(qǐng)并獲準(zhǔn)恢復(fù)藥物臨床試驗(yàn)的，該藥物臨床試驗(yàn)許可自行失效 。


第六十六條   對(duì)附條件批準(zhǔn)的藥品，持有人應(yīng)當(dāng)在藥品上市后采取相應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)管理措施，并在規(guī)定期限內(nèi)按照要求完成藥物臨床試驗(yàn)等相關(guān)研究，以補(bǔ)充申請(qǐng)方式申報(bào)。                                                                                                                                                




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案例：臨床期間發(fā)生的變更怎么做可比性研究？

            ---單克隆抗體在臨床試驗(yàn) II 期之后發(fā)生變更


圖片 背景：

  1. I、II 期臨床用的是雜交瘤（Hybridoma）細(xì)胞株，產(chǎn)量低；II期結(jié)束后，變更為CHO細(xì)胞株，細(xì)胞表達(dá)量提高10倍；相應(yīng)地，主細(xì)胞庫、工作細(xì)胞庫都變了；

  2. 工藝變更；生產(chǎn)規(guī)模變大；生產(chǎn)地點(diǎn)變化；

  3. 分析方法變更，采用靈敏度更高、分辨率更高的方法；如下表，


IND階段
工藝驗(yàn)證階段
SDS-PAGE
毛細(xì)管電泳（CE）
分子排阻高效液相色譜法 單分離柱（SEC-HPLC,   single column）
SEC-HPLC, dual column
離子交換高效液相（CEX）, 等電聚焦電泳（IEF gel）
毛細(xì)管等電聚焦 （cIEF）
無
增加了肽圖（Peptide Map）
生物學(xué)活性檢測：ELISA & 基于細(xì)胞的方法
基于細(xì)胞的方法
表征的分析方法
變化


圖片 解釋變更前后的差異

使用變更后樣品進(jìn)行SEC-HPLC 單分離柱試驗(yàn)時(shí)，在主峰和雙聚體之間，有個(gè)峰分離度不好；所以開發(fā)了雙分離柱試驗(yàn)，該峰分離度就好了。見下圖：

圖片

SEC-HPLC單分離柱、雙分離柱圖


采用SEC-HPLC 雙分離柱，對(duì)變更前、變更后樣品進(jìn)行檢驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)了兩者的差異。變更后的樣品多了雜峰，見下圖。把該雜峰分離出來，進(jìn)行鑒定。

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SEC-HPLC雙分離柱的變更前后樣品分析

采用CEX-HPLC進(jìn)行純度分析，發(fā)現(xiàn)了更大的差異。

圖片

CEX-HPLC檢驗(yàn)


采用唾液酸酶切后，檢驗(yàn)的單克隆抗體是相同的。因?yàn)樵缙谑褂玫碾s交瘤細(xì)胞株，與CHO相比，產(chǎn)品唾液酸含量非常高。

該單抗可能存在27種異構(gòu)體。

N端谷氨酰胺（Q）環(huán)化形成焦谷氨酸鹽(pE)，造成單抗電荷異質(zhì)性;

C端賴氨酸（K）不均一，正常情況下可以被羧肽酶切除。然而，這種切除是不完全的，通常會(huì)導(dǎo)致一條重鏈或兩條重鏈上還有賴氨酸殘基修飾。而當(dāng)細(xì)胞內(nèi)的羧肽酶水平較高時(shí)，兩條重鏈上則沒有賴氨酸殘基修飾。這便是C末端賴氨酸不均一性，也稱為k0、k1、k2。

唾液酸引起的三種電荷可能性。

對(duì)于離子交換高效液相（CEX-HPLC），流動(dòng)相的pH選擇非常關(guān)鍵，所以應(yīng)開發(fā)合適pH的離子交換高效液相方法。并且，繼續(xù)分析有無二硫鍵錯(cuò)配的異構(gòu)體。


圖片 可比性研究

表1 可比性研究分類分級(jí)

分類
包括的內(nèi)容
A：分析學(xué)檢測
批放行質(zhì)量控制（含量、純度、鑒別等）
額外的分析學(xué)特征
加速試驗(yàn)的降解產(chǎn)物
工藝相關(guān)雜質(zhì)
B：生物學(xué)特征
生物學(xué)活性
Fcγ受體、FcRn 、 C1q 受體結(jié)合力
ADCC、CDC
BIAcore或其它結(jié)合試驗(yàn)
C：動(dòng)物PK和PK-PD試驗(yàn)
嚙齒類的PK
靈長類的PK-PD
D：臨床PK可比性
變更前、變更后的產(chǎn)品在人體的直接可比性
E：臨床有效性研究
有效性、是否有新的不良事件、免疫原性變化的確認(rèn)
臨床試驗(yàn)（可能不需要頭對(duì)頭的比較）

表2 在關(guān)鍵臨床研究過程中或之后，發(fā)生的工藝變更及擬定可比性研究

工藝變更
分類a
細(xì)胞培養(yǎng)變化，表征沒有變化
如果單抗沒有細(xì)胞殺傷作用（cell killing），進(jìn)行A+Bb
如果單抗有細(xì)胞殺傷作用（mAb depletes cells），進(jìn)行A+B
回收率（Recovery）變化，表征沒有變化
如果單抗沒有細(xì)胞殺傷作用（cell killing），進(jìn)行A+Bb
如果單抗有細(xì)胞殺傷作用（mAb depletes cells），進(jìn)行A+B
細(xì)胞培養(yǎng)或回收率變化，電荷分布變化
進(jìn)行A+B+C
細(xì)胞培養(yǎng)變化，F(xiàn)c 糖基化分布變化
如果單抗沒有細(xì)胞殺傷作用（cell killing），進(jìn)行A+Bb
如果單抗有細(xì)胞殺傷作用（mAb depletes cells），進(jìn)行A+B
如果變化程度大，進(jìn)行A + B + C
從凍干制劑變?yōu)橐后w制劑，新的輔料
A+B+C+D
從凍干制劑變?yōu)橐后w制劑，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)變化，新增了小量其它形態(tài)（increased   minor forms）
A+B+C+E
活性成分濃度變化導(dǎo)致的制劑變化
A+B+C+D
從原始主細(xì)胞庫（MCB）衍生的新細(xì)胞株
A+B+C+D
重新轉(zhuǎn)化、或新宿主細(xì)胞衍生的新細(xì)胞株
A+B+C+E

a分類AB C D E的定義見表1；

b分類B包括的僅是放行需要的活性檢測試驗(yàn)；

表3 單抗工藝變更的案例，以及證明可比性進(jìn)行的PK-PD研究a

工藝變更，
以及發(fā)生時(shí)間
觀察到的理化性質(zhì)
非臨床PK–PD研究
臨床可比性研究
單抗細(xì)胞株變化，
臨床試驗(yàn) I 期
主峰輕微增加，堿性峰輕微降低
無b
無
單抗細(xì)胞株變化（從雜交瘤到CHO），
臨床 I 期
N/A
猴PK可比性研究（n=12/組），結(jié)果符合可比性
患者分組進(jìn)行平行PK研究（n≤10/組），結(jié)果符合可比性標(biāo)準(zhǔn)
單抗細(xì)胞株變化，
臨床 III 期前
N/A
大鼠PK可比性研究（n=6/組）c，結(jié)果顯示兩個(gè)產(chǎn)品沒有差別；未進(jìn)行正式生物等效性分析
無
單抗細(xì)胞株變化，
臨床 III 期前
堿性異構(gòu)體從4%增加到6-10%；酸性異構(gòu)體從25%降低到19%
大鼠PK可比性研究（n=12/組）d , AUC 0-14結(jié)果符合等效性標(biāo)準(zhǔn)
無
臨床 III 期用原材料（material）與后期不同
N/A
大鼠PK可比性研究（n=20/組）c，AUC 0-11d結(jié)果符合等效性標(biāo)準(zhǔn)
無
從臨床 III 期到工藝驗(yàn)證批次，單抗滴度增加
在Fc 區(qū)的 N 糖基化位點(diǎn)，Man5形態(tài)從2-4%增加到4-7%
小鼠PK可比性研究顯示，F(xiàn)c糖基化對(duì)清除（clearance）沒有影響
人體PK研究（n=37-46/組 , 平行設(shè)計(jì) , 單劑量） , AUC0-∝、AUC 0-last、AUC   max符合等效性標(biāo)準(zhǔn)
抗炎癥治療，正在接受FDA審評(píng)
N/A
兩個(gè)制劑在食蟹猴的PK可比性研究（n=6/組）
健康受試者，單劑量，PK可比性研究

a N/A，not applicable，不適用;

b進(jìn)行CDC、ADCC和受體結(jié)合ELISA試驗(yàn);

c進(jìn)行活性試驗(yàn);

d進(jìn)行FcgRs、FcRn、ADCC試驗(yàn);


該案例在美國FDA的申報(bào)：變更前的3-5批與變更后的3-5批，進(jìn)行頭對(duì)頭（head to head）的可比性研究。試驗(yàn)結(jié)果滿足可接受標(biāo)準(zhǔn)，且沒有發(fā)現(xiàn)新物質(zhì)產(chǎn)生，僅在動(dòng)物水平進(jìn)行橋接研究，未進(jìn)行人體橋接研究，直接進(jìn)入臨床Ⅲ期試驗(yàn)關(guān)鍵臨床研究。

該案例在歐洲EMA的申報(bào)：更換細(xì)胞株就是新產(chǎn)品，不接受可比性研究。